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技術原理
TMT試劑由三部分組成:質(zhì)量報告基團、質(zhì)量標準化基團和氨基反應基團。
質(zhì)量報告基團有10種不同的分子量,質(zhì)量標準化基團也10有種不同的分子量,與不同的報告基團搭配,能保證被標記的不同來源的同一肽段在一級質(zhì)譜中具有相同的質(zhì)荷比;氨基反應基團能與肽段N端及賴氨酸側鏈氨基發(fā)生共價連接使肽段連上標記。
一級質(zhì)譜中,任何一種TMT試劑標記的不同樣品中的同一肽段表現(xiàn)出相同的質(zhì)荷比;二級質(zhì)譜中,可切割鍵(箭頭所指)斷裂釋放出TMT報告離子,在質(zhì)譜低質(zhì)量區(qū)產(chǎn)生了10個TMT報告離子峰,其強度反應了該肽段在不同樣品中的相對表達量信息,另外二級質(zhì)譜中的肽段碎片離子峰質(zhì)荷比反應了該肽段的序列信息;這些質(zhì)譜原始數(shù)據(jù)經(jīng)過數(shù)據(jù)庫檢索,可得到蛋白質(zhì)的定性和相對定量信息。
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